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总RAN提取试剂盒 型号:431M288747 货号:

总RAN提取试剂盒

【制品说明】
本试剂盒适用于从各种来源的标本中抽提纯化总RNA。样品在依次加入Solution A和Solution B后,溶液会形成上清层,中间层和有机层(下层),RNA分布在上清层中,经异丙醇沉淀后回收得到总RNA。该方法经济实用、简单快速,保护了RNA的完整性,尽量去除了影响酶学反应的杂质。使用本试剂盒抽提纯化的总RNA,可以直接用于RT-PCR ,Real time RT-PCR,mRNA纯化,Northern杂交,构建cDNA文库 等分子生物学实验。
【适用标本】
动物组织
植物材料
昆虫样品
血液样品
细胞培养物
细菌、病毒等各种微生物培养液
各种体液标本
临床试子标本
粪便标本

【操作要点】

1. 沉淀核酸及以后的离心时,离心管的方向应该保持一致,以防止核酸丢失。
2. 提取RNA的操作,要尽量避免RNA酶的污染。
3. 弃上清的操作,要尽量去除残留上清。

【RNA定量】
1. 使用紫外分光光度计进行RNA定量。可取1μl RNA样品加入49μl TE(pH8.0)混匀, 注意不要产生气泡。
2. 以吸光度230, 260, 280 测定。
3. 浓度计算: A260 x 40 x 50 (稀释倍数) = 样品浓度μg/ml
4. 样品纯度: A260/A280 = 1.8 ~ 2.2 表示样品纯度高。通常A260/A230 = 2.0,如果该值偏低表示样品中混有盐类或蛋白质变性剂等。

【RNA保存方法】
短期保存: RNA可溶解于TE 缓冲液(10mM Tris, 1mM EDTA)或RNase-free水(0.1mM EDTA)中,保存于-20℃。在保存RNA样品时,EDTA通常被用来鳌和RNase以造成一个RNase-free的环境。值得注意的是,EDTA配制后常可使用很长时间甚至好几年。这种长期使用的EDTA溶液常有微生物存在,反而会造成RNase的污染。
中长期保存: RNA可溶解于TE 缓冲液(10mM Tris, 1mM EDTA)或RNase-free水(0.1mM EDTA)中,保存于-80℃。-80℃可防止RNA分解,通常可保存6个月左右。
长期保存:RNA最为安定的方法是RNA经乙醇沉 淀后,直接保存于-80℃(离心后不要弃上清,例如将RNA保存于醋酸氨/乙醇沉淀溶液中)。对于已经纯化好的RNA,如为离心后的RNA沉淀可加入70%的乙醇,保存于-80℃。如果为溶解于TE 缓冲液(10mM Tris, 1mM EDTA)或RNase-free水(0.1mM EDTA)中的RNA样品,可加入2倍体积的无水乙醇,保存于-80℃。如无-80℃冰箱或液氮,使用这些方法保存于-20℃也可以比较长期保存RNA。

总RAN提取试剂盒

 

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2008.12.19 lj h1